آزمون MBC & MIC
مقدمه
امروزه طیف گسترده ای از خدمات تست حساسیت آنتی بیوتیکی مانند حداقل غلظت مهاری (MIC) و حداقل غلظت باکتریایی (MBC) را مطابق با دستورالعمل های صادر شده توسط موسسه استانداردهای بالینی و آزمایشگاهی با استفاده از میکرو رقیق کردن براث، ماکرو رقت براث و انتشار دیسک ارائه می دهند، لذا در اینجا به منظور آشنایی بیشتر با آزمون MBC & MIC لازم است ادامه مطلب را بررسی کنید تا بتوانید شناخت و درک بهتری نسبت به این روش داشته باشید.
ذکر نکات مهم در بررسی آزمون MBC & MIC
خدمات تست حساسیت آنتی بیوتیکی آزمون MBC & MIC عبارتند از:
بررسی حداقل غلظت بازدارنده (MIC) کمک می کند تا تعیین کمترین غلظت یک عامل ضد میکروبی بررسی شود که این امر مانع از رشد قابل مشاهده میکروارگانیسم تحت شرایط آزمون تعریف شده است. هم چنین از مقادیر MIC برای ارزیابی فعالیت عوامل ضد میکروبی جدید و تعیین حساسیت NCE به میکروارگانیسم ها استفاده می کنند.
MIC به عنوان “استاندارد طلایی” برای تعیین حساسیت ارگانیسم ها به مواد ضد میکروبی در نظر گرفته می شود و بنابراین برای قضاوت در مورد عملکرد سایر روش های تست حساسیت استفاده می شود.
میکروب های کشت شده با NCE در غلظت های مختلف انکوبه می شوند و برای نتایج با استفاده از روش رقت آگار یا روش رقت براث اندازه گیری می شوند تا مشخص شود نقطه پایانی MIC در چه سطحی ایجاد شده است.
رقت آگار شامل ترکیب غلظت های مختلف ماده ضد میکروبی در محیط آگار مغذی و به دنبال آن اعمال تعداد استاندارد سلولی در سطح صفحه آگار است.
برای رقیقسازی محیط کشت، اغلب آن را در قالب صفحه میکروتیتر 96 چاهی تعیین میکنند، جایی که میکروارگانیسمها در حضور غلظتهای مختلف یک عامل ضد میکروبی به یک محیط رشد مایع تلقیح میشوند. رشد پس از انکوباسیون برای یک دوره زمانی مشخص (16-20 ساعت) و تا زمانی که مقدار MIC خوانده شود، ارزیابی می شود.
آزمایش حساسیت آزمون MBC & MIC معمولاً با استفاده از ارگانیسمهایی انجام میشود که به فرآیند عفونی شدن کمک میکنند که این امر شیمیدرمانی ضد میکروبی را تضمین میکند. چندین میکروارگانیسم مانند باکتری های هوازی یا بی هوازی و مخمرها را می توان بر اساس نیاز آزمایش کرد.
حداقل غلظت میکروب (MBC) برای کشتن باکتری در نظر گرفته می شود که برای آن استانداردهای 99.9٪ کاهش در تلقیح اولیه تعریف شده است. آزمون MBC & MIC را با کشت فرعی رقتهای مختلف که مانع از رشد یک ارگانیسم باکتریایی میشود، یعنی غلظتها در و بالاتر از MIC انتخاب کردن، مورد بررسی قرار می دهند. رقتهای مختلف روی آگار ریخته میشوند و به مدت 24 تا 48 ساعت انکوبه میشوند. MBC کمترین رقت ضد میکروبی است که از رشد ارگانیسم در صفحه آگار جلوگیری می کند.
عدم رشد ارگانیسم در صفحه نشان می دهد که فقط میکروارگانیسم های غیرقابل زنده وجود دارند. هدف از تست حساسیت انتشار دیسک Kirby-Bauer یا آزمون MIC & MBC تعیین حساسیت یا مقاومت باکتری های هوازی و بی هوازی به ترکیبات ضد میکروبی مختلف است تا به پزشک در انتخاب گزینه های درمانی برای بیماران خود کمک کند.
یک خط کش یا کولیس با اندازه میلی متر بردارید و “0” را در مرکز دیسک آنتی بیوتیک قرار دهید. از مرکز دیسک تا لبه ناحیه با رشد صفر اندازه گیری کنید. اندازه گیری خود را بر حسب میلی متر بگیرید.
این شعاع ناحیه مهار را اندازه میگیرد. در حقیقت تست Kirby-Bauer: در آزمایش Kirby-Bauer، دیسکهای حاوی آنتیبیوتیک روی آگار قرار میگیرند که باکتریها در آن رشد میکنند و آنتیبیوتیکها در آگار منتشر میشوند. آزمایشهای KB در شرایط استاندارد انجام میشوند و مناطق بازداری با اندازه استاندارد برای هر آنتیبیوتیک ایجاد شدهاند.
نتیجه گیری
تست کربی باوئر یا آزمون MIC & MBC از دیسکهای حاوی آنتیبیوتیک برای اندازهگیری حساسیت باکتریها به آنتیبیوتیکها با کشت باکتریها در بشقاب و قرار دادن دیسکهای خیسشده روی باکتریها استفاده میشود. سپس ناحیه مهار برای محاسبه حساسیت یا مقاومت باکتری اندازه گیری می شود. هنگامی که یک باکتری به دنبال کشت میکروبیولوژیکی شناسایی شد، آنتی بیوتیک ها برای آزمایش حساسیت انتخاب می شوند.
روشهای تست حساسیت مبتنی بر قرار دادن باکتریها در معرض آنتیبیوتیک و مشاهده پاسخ (تست فنوتیپی)، یا آزمایشهای ژنتیکی خاص (تست ژنتیکی) است. حساسیت آنتی بیوتیکی با اندازه گیری قطر مناطق مهار باکتری بررسی می شود.
ثبت ديدگاه